Tokushima University / Educator and Researcher Directory --- Matsuda, Yoshiko

Field of Study

○	Biochemistry

Subject of Study

○	プロセシングプロテアーゼの構造と生理機能, ペプチドホルモンの生合成調節機構, 血清タンパクの合成と分泌 (enzyme, protease, gene, peptide hormone, nerves)

Book / Paper

Book:

1.	石田寿昌, 石野良純, Hideaki Nagamune, 岡本敬の介, 梶本和昭, 加藤郁之進, 金保安則, 河野通明, 小池晴彦, 佐藤真悟, 鮫島勇次, Yasuo Shinohara, Akihiko Tsuji, Hiroshi Terada, 富田基郎, 友尾幸司, 野沢義則, 野元裕, 濱崎直孝, 日野真美, 平松宏一, 藤井敏, 藤井儀夫, 洪英満, Yoshiko Matsuda, 森秀治, 山崎尚志, 山本格 and 若原章男 : タンパク質と核酸の分離精製, 株式会社廣川書店, Tokyo, Jun. 2001.
2.	Yoshiko Matsuda, Akihiko Tsuji and Hideaki Nagamune : タンパク質と核酸の分離精製·基礎と実験(共著), 株式会社廣川書店, Tokyo, Jan. 2001. (Summary) 本著作はタンパク質と核酸の精製方法を解析したもので，松田·辻は細胞分画，蛋白質抽出法と精製法および核酸，DNA, plasmid, mRNAの分離，精製法について解説した．また長宗は，微量の生理活性タンパク質を調製して使用する際に必須である濃縮技術の中でも特に利用頻度の高い7種類の方法:塩析法，有機溶媒沈殿法，等電点沈殿法，脱水法，限外濾過法，凍結乾燥法，遠心真空蒸発法を例にとり，その原理や具体的な操作方法について解説を行った．
3.	Hideaki Nagamune, Kazuaki Muramatsu, Masakatsu Higashine, Tetsuya Akamatsu, Yasuhiro Tamai, Yasuo Yonetomi, Akihiko Tsuji, Keisuke Izumi, Takemasa Sakaguchi, Tetsuya Yoshida and Yoshiko Matsuda : Cyclic AMP-inducible procalcitonin processing in thyroidal parafollicular cells is regulated by the Kexin family protease, PC1., IOS Press, Amsterdam, Mar. 1997. (Summary) カルシウム調節ホルモンであるカルシトニンは甲状腺傍濾胞細胞より分泌されるが, 不活性な前駆体として合成された後, プロセシングを受けて初めて活性化される. 本研究ではcAMP刺激により著増するカルシトニンのプロセシングがKexin family proteaseに属する酵素PC1により調節されることを初めて明らかにした. (Keyword) Calcitonin / Processing / PC1
4.	Yoshiko Matsuda : プロテアーゼとそのインヒビター, MEDICAL VIEW CO., LTD., Tokyo, Jan. 1992.
5.	Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : 膜酵素基礎と実験II, 株式会社廣川書店, 東京都, May 1990. (Summary) 本書は，生体膜，膜結合酵素の生理学的機能研究法について詳細に解説したものである．
6.	Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : 膜酵素基礎と実験I, 株式会社廣川書店, 東京都, May 1990. (Summary) 本書は，生体膜分離法，及び膜結合酵素の全般的な研究法について詳細に解説したものである．
7.	阿久津秀雄, 伊藤明夫, Hideaki Nagamune, 久野健夫, 小南英紀, 田代裕, 田中啓二, Akihiko Tsuji, Hiroshi Terada, 中野明彦, 中安博司, 能見貴人, 日野幸伸, 二井将光, 前田正知, Yoshiko Matsuda, 三原勝芳, 克子山下 and 山本章嗣 : 膜酵素I –基礎と実験-，膜酵素II –基礎と実験-, 株式会社廣川書店, Tokyo, May 1990. (Summary) 本著作は膜酵素の精製や解析法を詳細に解説したものである．第7章では，膜酵素の膜結合様式，界面活性剤の性質，膜酵素の可溶化，精製，純度検定法について解説した．また，第8章(pp.208-239)においては，生物の神経伝達や原尿の再吸収において重要な役割を果たす細胞膜酵素Na,K-ATPaseの触媒サブユニットの構造解析を具体例に取り，蛋白質一次構造をコードするcDNA構造の解析手法を分かりやすく解説した．その際に必要となるDNAやRNAの取り扱い技術，クローニング技術なども，初心者にも分かりやすい表形式にして巻末(第二巻末: pp455-491)に紹介している．
8.	Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : 電気泳動法基礎と実験, 株式会社廣川書店, 東京都, Apr. 1989. (Summary) 本書は，最新の電気泳動の理論及び実験法を解説したものである．
9.	市川哲生, Fusao Ota, Hideaki Nagamune, 久保兼信, 桜林郁之介, 佐藤真悟, Yasuo Shinohara, 高木俊夫, 竹尾和典, 田中経彦, Akihiko Tsuji, Hiroshi Terada, 中尾真, 中村和行, 藤田清貴, Yoshiko Matsuda and 真鍋敬 : 電気泳動法 –基礎と実験-, 株式会社廣川書店, Tokyo, Apr. 1989. (Summary) 本著作は，タンパク質の電気泳動法の代表例を挙げてその原理や具体的実施法を詳細に解説している．辻らは等電点電気泳動の原理，方法，応用例を解説した．長宗らは，第7章(pp.255-305)においてゲル電気泳動後にゲル中で蛋白質を検出したり，泳動後の蛋白質を転写した膜上で特定の分子だけを検出する場合に汎用される方法の原理と具体的操作法を分かりやすく解説し，第9章(pp.329-344)では，泳動後のゲルの保存方法やゲル中からの蛋白質の回収方法を詳しく述べた．また第11章(pp.371-410)においては，電気泳動に用いられる各種試薬や標準蛋白質の性状について詳述するともに蛋白質の検出法や染色法の各論について，分かりやすい表形式で紹介した．
10.	Nobuhiko Katunuma, Yoshiko Matsuda, Akihiko Tsuji and Tsutomu Miura : Release and Modulation of Membrane-bound γ-Glutamyltranspeptidase by Limited Proteolysis, Springer-Verlag, Berlin, Jan. 1981. (Summary) 本研究は，γ-グルタミルトランスペプチダーゼの膜結合様式，可溶化様式，疾病との関連について調べた．

Academic Paper (Judged Full Paper):

1.	Keizo Yuasa, Tetsuya Masuda, Chihiro Yoshikawa, Masami Nagahama, Yoshiko Matsuda and Akihiko Tsuji : Subtilisin-like Proprotein Convertase PACE4 is Required for Skeletal Muscle Differentiation, The Journal of Biochemistry, Vol.146, No.3, 407-415, 2009. (Summary) Most growth factors stimulate myoblast proliferation and prevent differentiation, whereas insulin-like growth factors (IGFs) promote myoblast differentiation through the phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) pathway. Subtilisin-like proprotein convertases (SPCs) are involved in cell growth and differentiation via activation of pro-growth factors. However, the role of SPCs in myogenesis remains poorly understood. Here we show that PACE4, a member of the SPC family, plays a critical role in myogenic differentiation of C2C12 cells. PACE4 mRNA levels increased markedly during myogenesis, whereas the expression of other member of SPC family, furin and PC6, remained unchanged. The expression pattern of pro-IGF-II, which is processed extracellularly by SPCs, was similar to that of PACE4. The expression of shRNA targeting PACE4, but not furin, suppressed the expression of the muscle-specific myosin light chain (MLC). Interestingly, reduced expression of MLC was restored following treatment with recombinant mature IGF-II. Finally, we demonstrated that the PI3K inhibitor LY294002 blocked the induction of PACE4 mRNA, a result not observed when another myogenic differentiation inhibitor, SB203580 (p38 MAP kinase inhibitor), was employed, indicating the presence of a positive feedback loop regulating PACE4 expression. These results suggest that PACE4 plays an important role in myogenic differentiation through its association with the IGF-II pathway. (Keyword) Animals / Cell Differentiation / Cell Line / Feedback, Physiological / Gene Knockdown Techniques / Insulin-Like Growth Factor II / Matrix Metalloproteinase 11 / Mice / Muscle Development / MyoD Protein / Myoblasts, Skeletal / Myogenin / Myosin Light Chains / Phosphatidylinositol 3-Kinases / Proprotein Convertases / Protein Precursors / Signal Transduction / Up-Regulation / p38 Mitogen-Activated Protein Kinases (Link to Publication Site) ● Publication site (DOI): 10.1093/jb/mvp090 (Link to Search Site for Scientific Articles) ● PubMed @ National Institutes of Health, US National Library of Medicine (PMID): 19520771 ● Search Scopus @ Elsevier (PMID): 19520771 ● Search Scopus @ Elsevier (DOI): 10.1093/jb/mvp090 (DOI: 10.1093/jb/mvp090, PubMed: 19520771)
2.	Takuya Yanagino, Keizo Yuasa, Masami Nagahama, Yoshiko Matsuda and Akihiko Tsuji : Transcriptional Regulation of Fibrillin-2 Gene by E2F Family Members in Chondrocyte Differentiation, Journal of Cellular Biochemistry, Vol.106, No.4, 580-588, 2009. (Summary) Mutation in fibrillin-2, a major structural component of extracellular microfibrils in connective tissue, results in the autosomal dominant disease congenital contractural arachnodactyly. This genetic disease is characterized by dolichostenomelia and arachnodactyly, in addition to contractures of the large joints and abnormal pinnae formation, thus indicating the significance of fibrillin-2 in chondrogenesis. In this study, we investigated the transcriptional regulation of fibrillin-2 in chondrogenic differentiation. Although mRNA expression of fibrillin-1, a highly homologous protein to fibrillin-2, remained almost unchanged during chondrogenesis of mouse ATDC5 cells, fibrillin-2 mRNA expression varied. Fibrillin-2 was highly expressed at the early stage and declined progressively during differentiation. The 5'-flanking region of the fibrillin-2 gene contains potential binding sites for E2F, Runx, AP-2, and Sox transcription factors. The promoter activity of fibrillin-2 decreased markedly following deletion and mutagenesis of the E2F binding site between -143 and -136 bp. Overexpression of E2F1 resulted in a marked increase in its promoter activity, whereas expression of other transcription factors including AP-2alpha and Runx2 had no effect. The increase in promoter activity by E2F1 was completely suppressed by the coexpression of E2F4. E2F2 and E2F3 had positive effects on the promoter activity. Although ATDC5 cells expressed transcripts for the E2F family genes at all stages of differentiation, the expression profiles differed. E2F1 expression remained almost unchanged, whereas E2F4 expression increased markedly at the late stage of differentiation. These results indicated that coordinated expression of the E2F family is critical for the transcriptional regulation of fibrillin-2 during chondrogenesis. (Keyword) Animals / Cell Differentiation / Cell Line / Chondrocytes / Chondrogenesis / E2F Transcription Factors / E2F1 Transcription Factor / E2F2 Transcription Factor / E2F3 Transcription Factor / E2F4 Transcription Factor / Gene Expression Regulation / Mice / Microfilament Proteins / RNA, Messenger / Transcription, Genetic (Link to Publication Site) ● Publication site (DOI): 10.1002/jcb.22029 (Link to Search Site for Scientific Articles) ● PubMed @ National Institutes of Health, US National Library of Medicine (PMID): 19142862 ● Search Scopus @ Elsevier (PMID): 19142862 ● Search Scopus @ Elsevier (DOI): 10.1002/jcb.22029 (DOI: 10.1002/jcb.22029, PubMed: 19142862)
3.	Keizo Yuasa, Kaori Suzue, Masami Nagahama, Yoshiko Matsuda and Akihiko Tsuji : Transcriptional regulation of subtilisin-like proprotein convertase PACE4 by E2F: Possible role of E2F-mediated upregulation of PACE4 in tumor progression, Gene, Vol.402, No.1-2, 103-110, 2007. (Summary) PACE4, a member of the subtilisin-like proprotein convertase (SPC) family, is expressed at high levels in certain tumor cells and plays a role in metastatic progression through activation of matrix metalloproteinases. The mechanism leading to overexpression of PACE4 in tumor cells remains unclear. In this study, we show that the E2F1 transcription factor, which is implicated in carcinoma invasiveness, upregulates the expression of PACE4. HT1080 (highly tumorigenic and invasive) cells expressed much higher levels of PACE4 and E2F family (E2F1 and E2F2) transcripts than IMR90 (normal fibroblast) cells. Expression levels of other SPCs (furin and PC6) remained unchanged in these cells. Promoter analysis indicated that two E2F consensus binding sites (-117/-110 and -86/-79) in the 5'-flanking region of the human PACE4 gene function as positive regulatory elements. Mutation of these sites abolished PACE4 promoter response to E2F1 as well as binding of E2F1 in electrophoretic mobility-shift assays. Other E2F members, E2F2 and E2F3, also activated PACE4 expression, as in the case of E2F1. These results indicate a novel mechanism for E2F family-mediated promotion of carcinoma invasiveness through PACE4. (Keyword) Binding Sites / Cell Line, Tumor / Disease Progression / E2F Transcription Factors / E2F1 Transcription Factor / Electrophoretic Mobility Shift Assay / Gene Expression Regulation, Neoplastic / Humans / Neoplasms / Promoter Regions, Genetic / Proprotein Convertases / Serine Endopeptidases / Transcription, Genetic / Transfection / Up-Regulation (Link to Publication Site) ● Publication site (DOI): 10.1016/j.gene.2007.07.028 (Link to Search Site for Scientific Articles) ● PubMed @ National Institutes of Health, US National Library of Medicine (PMID): 17825503 ● Search Scopus @ Elsevier (PMID): 17825503 ● Search Scopus @ Elsevier (DOI): 10.1016/j.gene.2007.07.028 (DOI: 10.1016/j.gene.2007.07.028, PubMed: 17825503)
4.	Akihiko Tsuji, Hiroki Kanie, Hirotaka Makise, Keizo Yuasa, Masami Nagahama and Yoshiko Matsuda : Engineering of α1-antitrypsin cariants selective for subtilisin-like proprotein convertases PACE4 and PC6: Importance of the P2' residue in stable complex formation of the serpin with proprotein convertase, Protein Engineering, Design & Selection, Vol.20, No.4, 163-170, 2007. (Summary) Furin and PACE4, members of the subtilisin-like proprotein convertase (SPC) family, have been implicated in the metastatic progression of certain tumors in addition to the activation of viral coat proteins and bacterial toxins, indicating that these enzymes are potential targets for therapeutic agents. Alpha1-Antitrypsin Portland is an engineered alpha1-antitrypsin designed as a furin-specific inhibitor and has been used as a tool in the functional analysis of furin. In this work, we engineered rat alpha1-antitrypsin to create a PACE4-specific inhibitor. Substituting Arg-Arg-Arg-Arg for Ala-Val-Pro-Met(352) at P4-P1 and Ala for Leu(354) at P2' created a potent PACE4- and PC6-specific inhibitor. This variant (RRRRSA) formed an SDS- and heat-stable serpin/proteinase complex with PACE4 or PC6 and inhibited both enzyme activities. The RRRRSA variant was efficiently cleaved by furin without formation of the stable complex. This is the first report of a highly selective protein-based inhibitor of PACE4 and PC6. This inhibitor will be useful in delineating the roles of PACE4 and PC6 localized in the extracellular matrix. (Keyword) Amino Acid Sequence / Amino Acid Substitution / Animals / Binding Sites / Proprotein Convertase 5 / Proprotein Convertases / Protein Engineering / Rats / Serpins / alpha 1-Antitrypsin (Link to Publication Site) ● Publication site (DOI): 10.1093/protein/gzm007 (Link to Search Site for Scientific Articles) ● PubMed @ National Institutes of Health, US National Library of Medicine (PMID): 17351018 ● Search Scopus @ Elsevier (PMID): 17351018 ● Search Scopus @ Elsevier (DOI): 10.1093/protein/gzm007 (DOI: 10.1093/protein/gzm007, PubMed: 17351018)
5.	Akihiko Tsuji, Yayoi Kikuchi, Yukimi Sato, Shizuyo Koide, Keizo Yuasa, Masami Nagahama and Yoshiko Matsuda : A proteomic approach reveals transient association of reticulocalbin-3, a novel member of the CREC family, with the precursor of subtilisin-like proprotein convertase, PACE4, The Biochemical Journal, Vol.396, No.1, 51-59, 2006. (Summary) SPCs (subtilisin-like proprotein convertases) are a family of seven structurally related serine endoproteases that are involved in the proteolytic activation of proproteins. In an effort to examine the substrate protein for PACE4 (paired basic amino-acid-cleaving enzyme-4), an SPC, a potent protein inhibitor of PACE4, an alpha1-antitrypsin RVRR (Arg-Val-Arg-Arg) variant, was expressed in GH4C1 cells. Ectopic expression of the RVRR variant caused accumulation of the 48 kDa protein in cells. Sequence analysis indicates that the 48 kDa protein is a putative Ca2+-binding protein, RCN-3 (reticulocalbin-3), which had previously been predicted by bioinformatic analysis of cDNA from the human hypothalamus. RCN-3 is a member of the CREC (Cab45/reticulocalbin/ERC45/calumenin) family of multiple EF-hand Ca2+-binding proteins localized to the secretory pathway. The most interesting feature of the RCN-3 sequence is the presence of five Arg-Xaa-Xaa-Arg motifs, which represents the target sequence of SPCs. Biosynthetic studies showed that RCN-3 is transiently associated with proPACE4, but not with mature PACE4. Inhibition of PACE4 maturation by a Ca2+ ionophore resulted in accumulation of the proPACE4-RCN-3 complex in cells. Furthermore, autoactivation and secretion of PACE4 was increased upon co-expression with RCN-3. Our findings suggest that selective and transient association of RCN-3 with the precursor of PACE4 plays an important role in the biosynthesis of PACE4. (Keyword) Adenoma / Amino Acid Sequence / Animals / COS Cells / Calcium-Binding Proteins / Cell Line / Cell Line, Tumor / Cercopithecus aethiops / Enzyme Activation / Furin / Humans / Kidney / Molecular Sequence Data / Neoplasm Proteins / Pituitary Neoplasms / Proprotein Convertase 5 / Proprotein Convertases / Protein Binding / Protein Precursors / Proteomics / Rats / Recombinant Fusion Proteins / Sequence Alignment / Sequence Homology, Amino Acid / Serine Endopeptidases / Transfection / alpha 1-Antitrypsin (Link to Publication Site) ● Publication site (DOI): 10.1042/BJ20051524 (Link to Search Site for Scientific Articles) ● PubMed @ National Institutes of Health, US National Library of Medicine (PMID): 16433634 ● Search Scopus @ Elsevier (PMID): 16433634 ● Search Scopus @ Elsevier (DOI): 10.1042/BJ20051524 (DOI: 10.1042/BJ20051524, PubMed: 16433634)
6.	Akihiko Tsuji, Tadashi Yoshimoto, Keizo Yuasa and Yoshiko Matsuda : Pratamine: a unique and patent inhibitor of oligopeptidase B, Journal of Peptide Science, Vol.12, No.1, 65-71, 2006. (Summary) Oligopeptidase B is a serine endopeptidase found in prokaryotes, unicellular eukaryotes and higher plants. The enzyme has been shown recently to play a central role in the pathogenesis of several parasitic diseases such as African trypanosomiasis, and to be a potential therapeutic target. This study reports that protamine, a basic peptide rich in arginine, is a potent inhibitor at the nanomolar level of oligopeptidase B from E. coli and wheat. Protamines 1B, 2C, 3A and TP17 displayed similar inhibitory activities and were capable of binding strongly to oligopeptidase B without proteolytic cleavage. The concentration of protamine needed for 50% inhibition (IC50) of oligopeptidase B was 10(4)-fold lower than the IC50 of trypsin. Oligopeptidase B was highly sensitive to inhibition by protamines even in the presence of serum (IC50, 1 microM). These data indicate that protamines might provide information useful for the design of more specific synthetic oligopeptidase B inhibitors. (Keyword) Enzyme Inhibitors / Escherichia coli / Protamines / Serine Endopeptidases / Structure-Activity Relationship / Triticum (Link to Publication Site) ● Publication site (DOI): 10.1002/psc.683 (Link to Search Site for Scientific Articles) ● PubMed @ National Institutes of Health, US National Library of Medicine (PMID): 15948139 ● Search Scopus @ Elsevier (PMID): 15948139 ● Search Scopus @ Elsevier (DOI): 10.1002/psc.683 (DOI: 10.1002/psc.683, PubMed: 15948139)
7.	Akihiko Tsuji, Keizo Yuasa and Yoshiko Matsuda : Identification of Oligopeptidase B in Higher Plants. Purification and Characterization of Oligopeptidase B from Quiescent Wheat Embryo, Triticum aestivum, The Journal of Biochemistry, Vol.136, No.5, 673-681, 2004. (Summary) 小麦発芽過程において，著明に活性が上昇するセリンプロテアーゼを見出し，小麦胚芽より各種クロマトグラフィーによって単一に精製した．精製酵素はオリゴぺプチダーゼbに類似した酵素学的性質を有するとともに，その部分アミノ酸配列も大腸菌やトリパノゾーマオリゴぺプチダーゼbの配列と極めて相同性が高かった．以上の結果より，今までバクテリアやトリパノゾーマのみ存在すると考えられていたオリゴペプチダーゼbは高等植物にも存在することが蛋白レベルで証明された． (Keyword) Adrenocorticotropic Hormone / Amino Acid Sequence / Electrophoresis, Polyacrylamide Gel / Escherichia coli / Hydrogen-Ion Concentration / Hydrolysis / Kinetics / Molecular Sequence Data / Molecular Weight / Seeds / Sequence Alignment / Sequence Homology, Amino Acid / Serine Endopeptidases / Sodium Chloride / Somatostatin / Somatostatin-28 / Species Specificity / Time Factors / Triticum (Link to Publication Site) ● Publication site (DOI): 10.1093/jb/mvh163 (Link to Search Site for Scientific Articles) ● PubMed @ National Institutes of Health, US National Library of Medicine (PMID): 15632308 ● Search Scopus @ Elsevier (PMID): 15632308 ● Search Scopus @ Elsevier (DOI): 10.1093/jb/mvh163 (DOI: 10.1093/jb/mvh163, PubMed: 15632308)
8.	Akihiko Tsuji, Manami Tsuji, Hirimiti Takami, Shingo Nakamura and Yoshiko Matsuda : Molecular cloning and expression analysis of novel wheat cysteine protease, Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - General Subjects, Vol.1670, No.1, 84-89, 2004. (Summary) 小麦発芽過程で著明に発現量が増加する新規のシステインプロテアーゼのクローニングを行った．得られたcDNAから推定されるアミノ酸配列はこのプロテアーゼがパパインファミリーに属する新規のシステインプロテアーゼであることを示した．このプロテアーゼは小麦，大麦に存在し，米，シロイヌナズナには存在しなかった．抗体を作成し，その蛋白レベルにおける発現を調べると，発芽2日目以降に著明に増加することが判明し，小麦の発芽過程における細胞の増殖，分化に寄与している可能性が高い． (Keyword) Amino Acid Sequence / Base Sequence / Cloning, Molecular / Cysteine Endopeptidases / DNA, Complementary / Gene Expression Regulation, Enzymologic / Germination / Molecular Sequence Data / Sequence Alignment / Triticum (Link to Publication Site) ● Publication site (DOI): 10.1016/j.bbagen.2003.10.009 (Link to Search Site for Scientific Articles) ● PubMed @ National Institutes of Health, US National Library of Medicine (PMID): 14729145 ● Search Scopus @ Elsevier (PMID): 14729145 ● Search Scopus @ Elsevier (DOI): 10.1016/j.bbagen.2003.10.009 (DOI: 10.1016/j.bbagen.2003.10.009, PubMed: 14729145)
9.	Shizuyo Koide, Ichiro Yoshida, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : The expression of proprotein convertase PACE4 is highly regulated by Hash-2 in placenta: Possible role of placenta-specific basic helix-loop-helix transcription factor, human Achaete-Scute homologue-2, The Journal of Biochemistry, Vol.134, No.3, 433-440, 2003. (Summary) 培養細胞Bewoは絨毛癌に由来する培養細胞で，トロホブラスト細胞のモデル細胞として使われている．Bewo細胞にはPACE4が発現し，その発現はE-boxに結合するbHLH転写因子で制御されることを明らかにした．また，ヒト胎盤の免疫染色によってPACE4は胎盤トロホブラストの分化過程で発現量が変動することを見出した． (Keyword) Animals / Base Sequence / Cell Line, Tumor / E-Box Elements / Gene Expression Regulation / Helix-Loop-Helix Motifs / Humans / Placenta / Promoter Regions, Genetic / Proprotein Convertases / Rats / Serine Endopeptidases / Tissue Distribution / Transcription, Genetic / Transfection (Link to Publication Site) ● Publication site (DOI): 10.1093/jb/mvg161 (Link to Search Site for Scientific Articles) ● PubMed @ National Institutes of Health, US National Library of Medicine (PMID): 14561729 ● Search Scopus @ Elsevier (PMID): 14561729 ● Search Scopus @ Elsevier (DOI): 10.1093/jb/mvg161 (DOI: 10.1093/jb/mvg161, PubMed: 14561729)
10.	Akihiko Tsuji, Kensuke Sakurai, Emi Kiyokage, Takahito Yamazaki, Shizuyo Koide, Kazunori Toida, Kazunori Ishimura and Yoshiko Matsuda : Secretory proprotein convertases PACE4 and PC6A are heparin-binding proteins which are localized in the extracellular matrix. Potential role of PACE4 in the activation of proproteins in the extracellular matrix, Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Proteins and Proteomics, Vol.1645, No.1, 95-104, 2003. (Summary) PACE4のヘパリンセファロースゲルに対する結合能を調べた．PACE4はヘパリンカラムに強く結合し，塩化ナトリウム1モル以上の濃度で溶出された．また，結合したPACE4はヘパリンで溶出されたが，コンドロイチン硫酸では全く溶出されなかった．PACE4のC末に塩基性アミノ酸に富んだヘパリン結合部位を同定した．さらに，培養細胞を用いてPACE4は細胞外マトリックスに存在するプロテオグリカン分子のヘパラン硫酸糖鎖に結合していることを証明した． (Keyword) Amino Acid Sequence / Binding Sites / Cells, Cultured / Enzyme Activation / Extracellular Matrix / Heparan Sulfate Proteoglycans / Heparin / Humans / Immunohistochemistry / Molecular Sequence Data / Placenta / Proprotein Convertase 5 / Proprotein Convertases / Serine Endopeptidases / Subtilisins / Trophoblasts (Link to Publication Site) ● Publication site (DOI): 10.1016/S1570-9639(02)00532-0 (Link to Search Site for Scientific Articles) ● PubMed @ National Institutes of Health, US National Library of Medicine (PMID): 12535616 ● Search Scopus @ Elsevier (PMID): 12535616 ● Search Scopus @ Elsevier (DOI): 10.1016/S1570-9639(02)00532-0 (DOI: 10.1016/S1570-9639(02)00532-0, PubMed: 12535616)
11.	Miwa Bando, Atsushi Matsuoka, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : The proprotein convertase PACE4 is upregulated by PDGF-BB in megakaryocytes: gene expression of PACE4 and furin is regulated differently in Dami cells, The Journal of Biochemistry, Vol.132, No.1, 127-134, 2002. (Summary) The differentiation of megakaryocytes into platelets is highly regulated by many cytokines and growth factors. PACE4 and furin are Ca(2+)-dependent serine endoproteases belonging to the subtilisin-like proprotein convertase (SPC) family. These enzymes are involved in the proteolytic activation of proteins that play essential roles in cell growth and differentiation. In this study, we examined the expression of PACE4 and furin during the differentiation of megakaryoblastic cell lines, Dami and HEL cells, induced by phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA). PMA stimulates not only the expression of platelet-derived growth factor-B (PDGF-B) mRNA, but also PACE4 mRNA in these cell lines. The expression of PACE4 transcripts (both the PACE4A and PACE4C/CS isoforms) was upregulated more than 4-fold by PMA. Moreover, direct treatment with PDGF-BB also resulted in an increase in the level of PACE4 mRNA. Further, the effect of PDGF-BB on PACE4 expression was confirmed by promoter assay of the PACE4 gene. Although the furin mRNA level was increased by TGF-beta1 in Dami cells, it was not affected by PDGF-BB. These results indicate for the first time that PACE4 expression is specifically upregulated by PDGF-BB in differentiated megakaryoblasts, suggesting a unique role for PACE4 in platelet production. (Keyword) megakaryocytes / PACE4 / PDGF-BB / proprotein convertase / transcriprional regulation (Link to Search Site for Scientific Articles) ● PubMed @ National Institutes of Health, US National Library of Medicine (PMID): 12097169 ● CiNii @ National Institute of Informatics (CRID): 1390282679908516864 ● Summary page in Scopus @ Elsevier: 2-s2.0-0036330386 (PubMed: 12097169, CiNii: 1390282679908516864, Elsevier: Scopus)
12.	Akihiko Tsuji, Takayuki Ikoma, Emi Hashimoto and Yoshiko Matsuda : Development of selectivity of α1-antitrypsin variant by mutagenesis in its reactive site loop against proprotein convertase. A crutial role of the P4 arginine in PACE4 inhibition, Protein Engineering, Vol.15, No.2, 123-130, 2002. (Summary) ズブチリシンプロプロテインコンベルターゼ(SPC)は，哺乳類では7種類が同定されているが，これらの酵素は類似した基質特異性を持ち，さらに複数の酵素がひとつの細胞で発現しているため，その生理機能解析は困難である．本研究では，これらSPCの機能解析のツールとして使用できる選択的阻害特性を有する阻害タンパクを作成することを目的として，アンチトリプシンのタンパク工学的改変を行い，その阻害特異性について検討した．SPCの中でPACE4とFurinを識別可能な改変体を作成することができた． (Keyword) Animals / Arginine / Cadherins / DNA Primers / Furin / Humans / Mutagenesis, Site-Directed / Polymerase Chain Reaction / Precipitin Tests / Proprotein Convertase 5 / Proprotein Convertases / Rats / Recombinant Proteins / Serine Endopeptidases / Serine Proteinase Inhibitors / Subtilisins / Transfection / Tumor Cells, Cultured / alpha 1-Antitrypsin (Link to Publication Site) ● Publication site (DOI): 10.1093/protein/15.2.123 (Link to Search Site for Scientific Articles) ● PubMed @ National Institutes of Health, US National Library of Medicine (PMID): 11917148 ● Search Scopus @ Elsevier (PMID): 11917148 ● Search Scopus @ Elsevier (DOI): 10.1093/protein/15.2.123 (DOI: 10.1093/protein/15.2.123, PubMed: 11917148)
13.	Takazumi Taniguchi, Rieko Kuroda, Kensuke Sakurai, Masami Nagahama, Ikuo Wada, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : A Critical Role for the Carboxy Terminal Region of the Proprotein Convertase, PACE4A, in the Regulation of Its Autocatalytic Activation Coupled with Secretion, Biochemical and Biophysical Research Communications, Vol.290, No.2, 878-884, 2002. (Summary) ズブチリン様プロプロテインコンベルターゼファミリーであるPACE4は，自己活性化されたのち分泌されるが，培養細胞で過剰発現しても，その自己活性化速度が非常に遅いため，分泌される活性型酵素の量が少ない．本研究では，PACE4のC末端側に自己活性化を制御する領域があることを証明した． (Keyword) Amino Acid Sequence / Cell Line / Enzyme Activation / Humans / Kidney / Molecular Sequence Data / Mutagenesis, Site-Directed / Peptide Fragments / Proprotein Convertases / Protein Precursors / Protein Processing, Post-Translational / Protein Structure, Quaternary / Sequence Deletion / Serine Endopeptidases / structureactivity relationship / Subtilisins / Ultracentrifugation (Link to Publication Site) ● Publication site (DOI): 10.1006/bbrc.2001.6282 (Link to Search Site for Scientific Articles) ● PubMed @ National Institutes of Health, US National Library of Medicine (PMID): 11785985 ● Search Scopus @ Elsevier (PMID): 11785985 ● Search Scopus @ Elsevier (DOI): 10.1006/bbrc.2001.6282 (DOI: 10.1006/bbrc.2001.6282, PubMed: 11785985)
14.	Ichiro Yoshida, Shizuyo Koide, Shin-ichi Hasegawa, Akira Nakagawara, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : Proprotein convertase PACE4 is down-regulated by the basic helix-loop-helix transcription factor hASH-1 and MASH-1, The Biochemical Journal, Vol.360, No.3, 683-689, 2001. (Summary) Mash-1は，神経分化に必須のbHLH型転写因子であるが，その標的遺伝子は不明である．本研究では，種々のMash-1発現量の異なるヒト神経芽細胞腫を用いて，Mash-1のズブチリシン様プロプロテインコンベルターゼであるPACE4発現に及ぼす影響について検討し，Mash-1はPACE4遺伝子上流のE-boxクラスタに結合し，そのプロモーター活性をネガティブに制御する転写因子であることを証明した． (Link to Publication Site) ● Publication site (DOI): 10.1042/0264-6021:3600683 (Link to Search Site for Scientific Articles) ● CiNii @ National Institute of Informatics (CRID): 1573950399804603392 ● Summary page in Scopus @ Elsevier: 2-s2.0-0035893574 (DOI: 10.1042/0264-6021:3600683, CiNii: 1573950399804603392, Elsevier: Scopus)
15.	Tetsuya Akamatsu, Yoshiko Matsuda, Keiko Tsumura, Jun Tada, Most Nahid Parvin, Wei Wei, Norio Kanamori and Kazuo Hosoi : Highly regulated expression of subtilisin-like proprotein convertase PACE4 (SPC4) during dentinogenesis., Biochemical and Biophysical Research Communications, Vol.272, No.2, 410-415, 2000. (Summary) Expressions of mRNAs for four subtilisin-like proprotein convertases (SPCs: furin, PACE4, PC6, and PC8) and bone morphogenetic protein 4 (BMP4) in the rat molar tooth during development were analyzed by Northern blotting, reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR), and in situ hybridization to explore the possible involvement of SPCs in the processing of proBMPs. We found a temporospacial expression of PACE4, but not one of the other SPCs, in this tissue; i.e., RT-PCR analysis revealed that the level of PACE4 mRNA, but not that of the other SPC mRNAs became high around the second postnatal day. This increase was in good accordance with the increase in BMP4 mRNA, indicating an apparent association of these molecules with the differentiation and establishment of functional ameloblasts and odontoblasts. During dentinogenesis, PACE4 mRNA was localized in the ameloblasts and odontoblasts. These observations suggest that PACE4 plays a crucial role in dentinogenesis, especially via the activation of BMPs. (Keyword) Processing protease / PACE4 / Dentinogenesis / Gene expression (Link to Publication Site) ● Publication site (DOI): 10.1006/bbrc.2000.2752 (Link to Search Site for Scientific Articles) ● PubMed @ National Institutes of Health, US National Library of Medicine (PMID): 10833428 ● Summary page in Scopus @ Elsevier: 2-s2.0-0034616641 (DOI: 10.1006/bbrc.2000.2752, PubMed: 10833428, Elsevier: Scopus)
16.	Tetsuya Akamatsu, Yoshiko Matsuda, Keiko Tsumura, Jun Tada, Most Nahid Parvin, Norio Kanamori and Kazuo Hosoi : Subtilisin-like proprotein convertase PACE4 (SPC4) is a candidate processing enzyme of bone morphogenetic proteins during tooth formation, Developmental Dynamics, Vol.216, No.4/5, 481-488, 1999. (Summary) サチライシン様プロセシング酵素PACE4が歯牙形成過程において時期·空間特異的に発現し，歯牙形成に必須の骨形成蛋白質群(BMPs)と一致して局在することから， PACE4が歯牙形成時の最も有力なBMPsプロセシング酵素で， BMPsの活性化によりエナメル芽細胞と象牙芽細胞の分化成熟と密接に関わることを見い出した． (Keyword) Processing protease / PACE4 / Bone morphogenetic protein / Tooth / Development
17.	Kenji Mori, Akiyoshi Imamaki, Kaya Nagata, Yasuo Yonetomi, Ryoko Kiyokage-Yoshimoto, John T Martin, Matthew T Gillespie, Masami Nagahama, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : Subtilisin-Like Proprotein Convertase, PACE4 and PC8, as Well as Furin, are Endogenous Proalbumin Convertases in HepG₂ Cells, The Journal of Biochemistry, Vol.125, No.3, 627-633, 1999. (Summary) 血清アルブミンはプロ体として肝臓で合成されたのち，細胞内でプロペプチドがプロセスされ血液中に分泌される．しかしこのプロセシング機構についてはまだ不明な点が多い．本研究では，アンチセンスRNA法を用いて，ズブチリシン様プロプロテインコンベルターゼであるFurin, PACE4, PC8のアルブミンプロセシングにおける役割を解析し，Furinのみならず，PACE4, PC8もアルブミンプロセシングに関わっていることを証明した．
18.	Akihiko Tsuji, Emi Hashimoto, Takayuki Ikoma, Takazumi Taniguchi, Kenji Mori, Masami Nagahama and Yoshiko Matsuda : Inactivation of Proprotein Convertase, PACE4 by α₁-Antitrypsin Portland (α₁-PDX) which is a Blocker of Proteolytic Activation of Bone Morphogenetic Protein during Embryogenesis., The Journal of Biochemistry, Vol.126, No.3, 591-603, 1999. (Summary) PACE4はSPCファミリーに属するプロテアーゼで，特に細胞分化過程でその発現量が高度に制御されているが，その機能に関しては不明な点が多い．本研究では，BMPの活性化を阻害し，細胞分化を抑制するアンチトリプシン改変体が，PACE4に対して強い阻害作用を持つことを証明し，PACE4がBMPプロセシングプロテアーゼとして機能していることを示唆した．またPACE4の酵素学的性質についても検討した．
19.	Akihiko Tsuji, Shigeru Yoshida, Shinichi Hasegawa, Miwa Bando, Ichiro Yoshida, Shizuyo Koide, Kenji Mori and Yoshiko Matsuda : Human Subtilisin-Like Proprotein Convertase, PACE4 (SPC4) Gene Expression Is Highly Regulated through E-Box Elements in HepG₂ and GH₄C₁ Cells, The Journal of Biochemistry, Vol.126, No.3, 494-502, 1999. (Summary) ヒトPACE4の発現制御機構を明らかにするため，その遺伝子5'上流域の構造，機能解析を行った．ヒトPACE4遺伝子上流域には多くの転写因子結合サイトが認められたが，特に上流1kbにE-box配列が12個存在した．リポータージーンアッセイにより，E4-E9のE-boxクラスタが強力な負のエンハンサーとして機能していることを明らかにした．E-boxに結合するbHLH型転写因子は細胞分化を制御するものが多く，PACE4と細胞分化の関わりを示唆した．
20.	Masami Nagahama, Takazumi Taniguchi, Emi Hashimoto, Akiyoshi Imamaki, Kenji Mori, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : Biosynthetic processing and quoternary interactions of proprotein convertase SPC4 (PACE4)., FEBS Letters, Vol.434, No.1, 155-159, 1998. (Summary) ズブチリン様プロプロテインコンベルターゼファミリーに属するPACE4の活性化機構について解析した．プロPACE4のプロペプチドの切断はPACE4の活性基を変異した不活性体では起こらず，また不活性体と活性体を共発現しても不活性体のプロセシングがなかったことから，このプロセシングは分子内自己活性化であることを証明した．また自己活性化はPACE4の分泌に必須であり，PACE4の活性化と細胞内移行は共役していることを明らかにした．
21.	Masami Nagahama, Takazumi Taniguchi, Emi Hashimoto, Akiyoshi Imamaki, Kenji Mori, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : Biosynthetic processing and quaternary interactions of proprotein convertase SPC4 (PACE4)., FEBS Letter, Vol.434, 155-159, 1998.
22.	Hideaki Nagamune, Hiroki Kourai, Ayako Katsuura, Yasuki Taoka, Kenzo Fushitani, Robert A. Whiley, Kikuji Yamashita, Akihiko Tsuji, Yoshiko Matsuda, Hiroki Kourai and Seiichiro Kitamura : Intermedilysin A cytolytic toxin specific for human cells of a Streptococcus intermedius isolated from human liver abscess in "Streptococci and The Host", Advances in Experimental Medicine and Biology, Vol.418, 773-775, 1997. (Summary) S. intermedius肝膿瘍分離株から単離されたヒト細胞特異的な細胞溶解毒素インターメディリシン(ILY)の性質を検討した．これまで知られていたチオール基修飾試薬への非感受性やコレステロールへの低感受性に加え，電子顕微鏡観察からILYは直径30-50nmの膜孔を形成し細胞を破壊することが示された．またILYの部分遺伝子構造解析の結果からILYはチオール活性化毒素群と同じ分子祖先から進化したものであることが示唆された．
23.	Akihiko Tsuji, Chiemi Hine, Yasuhiro Tamai, Kayoko Yonemoto, Kazushige Mori, Shigeru Yoshida, Miwa Bando, Eri Sakai, Kenji Mori, Tetsuya Akamatsu and Yoshiko Matsuda : Genomic organization and alternative splicing of human PACE4 (SPC4), Kexin-like processing endoprotease., The Journal of Biochemistry, Vol.122, No.2, 438-452, 1997. (Summary) 本研究ではプロセシング酵素Kexin familyの1つPACE4のヒトゲノムを単離し, その構造を解析し, ファミリーの中でも最も大きく複雑な構造であること, 多種類存在するアイソフォームが全て同一遺伝子から選択的スプライシングにより生じること, およびプロモーター領域がユニークな構造であること等を初めて明らかにした. (Keyword) Processing protease / PACE4 / Gene structure / Alternative splicing
24.	Tetsuya Akamatsu, Shigeo Daikoku, Hideaki Nagamune, Shigeru Yoshida, Kenji Mori, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : Developmental expression of a novel Kexin family protease, PACE4E, in the rat olfactory system., Histochemistry and Cell Biology, Vol.108, No.2, 95-103, 1997. (Summary) 本研究では新規Kexin family proteaseであるPACE4Eがラット脳発生過程において時期·空間特異的に発現することを明らかにし, 特に嗅球においては僧帽細胞に極めて特異的に発現し, 僧帽細胞の分化成熟と密接に関わることを見い出した. (Keyword) Processing protease / Olfactory system / Mitral cell
25.	Kenji Mori, Sachiko Kii, Akihiko Tsuji, Masami Nagahama, Akiyoshi Imamaki, Keiko Hayashi, Tetsuya Akamatsu, Hideaki Nagamune and Yoshiko Matsuda : A Novel Human PACE4 Isoform, PACE4E Is an Active Processing Protease Containing a Hydrophobic Cluster at the Carboxy Terminus, The Journal of Biochemistry, Vol.121, No.5, 941-948, 1997. (Summary) ズブチリシン様プロプロテインコンベルターゼファミリーに属するPACE4の新規アイソフォームPACE4E-I, PACE4E-IIをヒト脳cDNAライブラリーよりクローニングした．PACE4Eは，PACE4Aと比べ，C末に75残基からなる，疎水性アミノ酸のクラスタを含むユニークな配列を持っていた．この部分を欠失したPACE4Eは分泌速度が上昇した．共発現実験によって，PACE4E-1, E-IIは，PACE4Aと同様にプロセシング活性を持っていることが証明された．
26.	Haruyuki Nakayama, Takemi Kinouchi, Keiko Kataoka, Shigeru Akimoto, Yoshiko Matsuda and Yoshinari Ohnishi : Intestinal anaerobic bacteria hydrolyse sorivudine, producing the high blood concentration of 5-(E)-(2-bromovinyl)uracil that increases the level and toxicity of 5-fluorouracil., Pharmacogenetics, Vol.7, No.1, 35-43, 1997. (Summary) Sorivudine, 1-beta-D-arabinofuranosyl-5-(E)-(2-bromovinyl)uracil, is a potent antiviral agent against varicella-zoster virus and herpes simplex virus type 1. However, sorivudine should not be used in combination with anticancer drugs such as 5-fluorouracil (5-FU) because (E)-5-(2-bromovinyl)uracil (BVU), a metabolite of sorivudine, inhibits the degradation of 5-FU, resulting in its accumulation in the blood and marked enhancement of the toxicity of 5-FU. Since phosphorolytic enzymes generate BVU from sorivudine, we investigated the distribution of the enzyme activity in rats. High activity was found in the cecal and large intestinal contents, while very low or no detectable activity in the liver, kidney, stomach, cecum, large intestine, and the stomach and small intestinal contents. These results suggest that intestinal microflora play an important role in BVU production. Therefore, we measured the phosphorylase activity in cell-free extracts from 23 aerobes, 16 anaerobes and a fungus. Bacteroides species B. vulgatus, B. thetaiotaomicron, B. fragilis, B. uniformis and B. eggerthii, dominant members of intestinal microflora, had high activity to convert sorivudine to BVU. To elucidate the contribution of intestinal microflora to BVU production in vivo, we administered sorivudine to rats treated with several antibiotics and measured the BVU concentration in the serum of rats. When sorivudine was given to rats treated with ampicillin or a mixture of bacitracin, neomycin and streptomycin, which decreased the numbers of viable aerobes and anaerobes, only a small amount of BVU was found in the serum. BVU concentration in the serum of rats treated with metronidazole to decrease the number of intestinal anaerobes was also very low. In contrast, BVU concentration in the serum of rats treated with kanamycin, which was used to decrease the number of aerobes selectively, was higher than that of non-treated rats. These results also suggest that BVU is produced by intestinal anaerobic bacteria especially Bacteroides species in vivo. (Keyword) Animals / Antiviral Agents / Arabinofuranosyluracil / Bacteria, Anaerobic / Bacteroides / Biotransformation / Bromouracil / Cecum / Fluorouracil / Gastric Mucosa / Gastrointestinal Contents / Intestinal Mucosa / Kidney / Liver / Male / Organ Specificity / Pentosyltransferases / Pyrimidine Phosphorylases / Rats / Rats, Sprague-Dawley (Link to Search Site for Scientific Articles) ● PubMed @ National Institutes of Health, US National Library of Medicine (PMID): 9110360 ● CiNii @ National Institute of Informatics (CRID): 1570854175671010176 ● Search Scopus @ Elsevier (PMID): 9110360 (PubMed: 9110360, CiNii: 1570854175671010176)
27.	Hideaki Nagamune, Kazuaki Muramatsu, Masakatsu Higashine, Tetsuya Akamatsu, Yasuhiro Tamai, Yasuo Yonetomi, Akihiko Tsuji, Keisuke Izumi, Takemasa Sakaguchi, Tetsuya Yoshida and Yoshiko Matsuda : Cyclic AMP-inducible procalcitonin processing in thyroidal parafollicular cells is regulated by the kexin family protease, PC1, Biomedical and Health Research, Vol.15, 22-33, 1997. (Summary) 甲状腺におけるカルシトニンのプロセシングに関与するズブチリシン様プロプロテインコンベルターゼを同定するため，特異抗体による免疫染色とモデル細胞TT細胞におけるcAMPの影響について調べた．カルシトニン産生細胞で発現していたのは，主にPC1とPC2であったが，カルシトニンの産生を刺激するcAMPによって発現が増加したのは，PC1であった．これらの結果は，PC1がプロカルシトニンの活性化酵素であることを示している．
28.	Hideaki Nagamune, Chikako Ohnishi, Ayako Katsuura, Kenzo Fushitani, Robert A. Whiley, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : Intermedilysin, a novel cytotoxin specific for human cells, secreted by Streptococcus intermedius UNS46 isolated from a human liver abscess, Infection and Immunity, Vol.64, No.8, 3093-3100, 1996. (Summary) S. intermediusのヒト肝膿瘍分離株がヒト細胞特異的な細胞溶解毒素インターメディリシン(ILY)を分泌することを発見した． ILYは約54KDaの蛋白で，その部分一次構造はニューモリシンと高い相同性を示した．しかしSH修飾試薬により失活せず，コレステロール対しても感受性が低かった．またトリプシン処理したヒト赤血球はILYに対して抵抗性を示すようになることから，ILY作用には宿主細胞膜の蛋白質が関与している事が示された．
29.	Akihiko Tsuji, Keisuke Edazawa, Koji Sakiyama, Kaya Nagata, Yuka Sasaki, Hideaki Nagamune and Yoshiko Matsuda : Purification and characterization of a novel serine proteinase from the microsomal fraction of bovine pancreas., The Journal of Biochemistry, Vol.119, No.1, 100-105, 1996. (Summary) 牛膵臓膜画分より，CHAPSによる可溶化，ゲルろ過，トリプシンインヒビターセファロース，アルギニンーセファロースによって，新規のトリプシン様セリンプロテアーゼを単一に精製した．この酵素は分子量29500で，グルカゴンを用いて切断特異性を調べると，塩基性アミノ酸とロイシンのC末側を切断した．N末のアミノ酸配列は，エラスターゼIV, II, IIIに類似していた．
30.	Akihiko Tsuji, Hideaki Nagamune, Tetsuya Akamatsu, Chiemi Hine, Kazuaki Muramatsu, Kenji Mori, Yasuhiro Tamai, Kayoko Yonemoto and Yoshiko Matsuda : Novel members of mammalian kexin family proteases, PACE4C, PACE4D, PC7A and PC7B., Intracellular Protein Catabolism, Vol.389, 63-71, 1996.
31.	Hideaki Nagamune, Kazuaki Muramatsu, Tetsuya Akamatsu, Yasuhiro Tamai, Keisuke Izumi, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : Distribution of the kexin family proteases in pancreatic islets., --- PACE4C is specifically expressed in B cells of pancreatic islets ---, Endocrinology, Vol.136, No.1, 357-360, 1995. (Summary) Kexin Family Proteasesはペプチドホルモン等のプロセシング酵素として同定され, 血糖調節ホルモンのインスリン等のプロセシングにも関与することが示唆されていたが, 本研究では我々が新規にクローニングしたPACE4CをはじめとするKexin Family Proteasesとインスリン等との膵島細胞での局在, 共存関係を初めて明らかにし, その成果は雑誌表紙にも掲載された. (Keyword) Precessing protease / Pancreatic islet / Insulin / Glucagon
32.	Akihiko Tsuji, Chiemi Hine, Kenji Mori, Yasuhiro Tamai, Kazuya Higashine, Hideaki Nagamune and Yoshiko Matsuda : A Novel Member, PC7, of The Mammalian Kexin-Like Protease Family, --- Homology to PACE4A, Its Brainspecific Expression and Identification of Isoforms ---, Biochemical and Biophysical Research Communications, Vol.202, No.3, 1452-1459, 1994. (Summary) 哺乳類には7種類のKexin様プロプロテインコンベルターゼが存在する．哺乳類Kexin様プロテアーゼ間で保存された触媒領域のプライマーを用い，ラット脳下垂体からcDNA断片をPCR増幅し，これをプローブにしてラット脳下垂体cDNAライブラリーからPC7をクローニングした．PC7(PC7AとPC7B)はRXKRの活性化サイトを持ち，触媒，HomoB及びシステインリッチ領域を持っており，PACE4Aと非常に高いホモロジーを示した．PC7は脳で強く発現し，肝，腎，心，脾では検出されなかった．
33.	Akihiko Tsuji, Kenji Mori, Chiemi Hine, Yasuhiro Tamai, Hideaki Nagamune and Yoshiko Matsuda : The tissue distribution of mRNAs for the PACE4 isoforms, kexin-like processing protease: PACE4C and PACE4D mRNAs are major transcripts among PACE4 isoforms, Biochemical and Biophysical Research Communications, Vol.202, No.3, 1215-1221, 1994. (Summary) 新たに見いだされたPACE4アイソフォーム(PACE4CとPACE4D)の組織分布をRT-PCR法を用いて解析した．両アイソフォームのmRNAともに，PACE4Aと同様に多くの組織で見いだされたが，それぞれの発現パターンは異なっていた．また，PACE4C及びPACE4DのmRNAはPACE4Aのそれより遙かに多く，PACE4 mRNAの主要な部分はPACE4CとPACE4DのmRNAである事が示唆された．
34.	Akihiko Tsuji, Ryoichi Oda, Kohji Sakiyama, Hideaki Nagamune, Kouji Itou, Ryoichi Kase, Hitoshi Sakuraba, Yoshiyuki Suzuki and Yoshiko Matsuda : Lysosomal enzyme replacement using α2-macroglobulin as a transport vehicle, The Journal of Biochemistry, Vol.115, No.5, 937-944, 1994. (Summary) α2-マクログロブリン(α2M)を運搬担体に用いたリソソーム酵素欠損性遺伝病の酵素補充療法システムを開発した． α2Mはレセプターを介してリソソームに取り込まれることから，豚肝臓から精製した α-グルコシダーゼ或いはα-ガラクトシダーゼにα2Mを運搬担体として二価架橋試薬で連結し，リソソーム指向性の酵素補充療法剤を構築した．これを用いてin vitro実験を行い，ポンペ病及びファブリー病細胞の細胞病態が改善されることを証明した．
35.	Akihiko Tsuji, Kazuya Higashine, Chiemi Hine, Kenji Mori, Yasuhiro Tamai, Hideaki Nagamune and Yoshiko Matsuda : Identification of Novel cDNAs Encording Human Kexin-like Protease, PACE4 Isoforms, Biochemical and Biophysical Research Communications, Vol.200, No.2, 943-950, 1994. (Summary) ヒト胎盤cDNAライブラリーより，新規のPACE4アイソフォーム，PACE4CとPACE4Dをクローニングし，塩基配列を決定した．PACE4Cは，PACE4AのC末に存在するシステインリッチ領域を持たず，ホモBドメインのC末にC-特異的配列を持っていた．PACE4Dはシグナルペプチド，プロペプチドおよびシステインリッチ領域を欠失していた．
36.	Akihiko Tsuji, Tetsuya Akamatsu, Hideaki Nagamune and Yoshiko Matsuda : Identification of targeting proteinase for rat α1-macroglobulin in vivo., --- Mast-cell tryptase is a major component of the α1-macroglobulin-proteinase complex endocytosed into rat liver lysosomes. ---, The Biochemical Journal, Vol.298, No.1, 79-85, 1994. (Summary) 血清蛋白質であるα-マクログロブリン(αM)は種々の酵素に対するインヒビターとして機能すると考えられていたが, 生体内で標的となる酵素は不明であった. 本研究ではαMが酵素と複合体形成後, リソゾームに運ばれ分解されることに着目し, リソゾーム内の分解を抑制したラット肝臓リソゾームよりαM-酵素複合体を単離し, 肥満細胞トリプターゼが生体内でαMの標的酵素の1つであることを初めて明らかにした. (Keyword) α-macroglobulin / Mast-cell tryptase / Lysosome
37.	Katsuko Yamashita, Yoko Tachibana, Akira Hitoi, Yoshiko Matsuda, Akihiko Tsuji, Nobuhiko Katunuma and Akira Kobata : Differences in the sugar chains of two subunits and isozymic forms of rat kidney γ-glutamyltranspeptidase, Archives of Biochemistry and Biophysics, Vol.227, No.1, 225-232, 1983. (Summary) 本研究は，ラット腎γ-グルタミルトランスぺプチダーゼを構成する2種のサブユニットの糖鎖構造を各々明らかにしたものである．
38.	Katsuko Yamashita, Akira Hitoi, Yoshiko Matsuda, Akihiko Tsuji, Nobuhiko Katunuma and Akira Kobata : Structural studies of the carbohydrate moieties of rat kidney γ-glutamyltranspeptidase, The Journal of Biological Chemistry, Vol.258, No.2, 1098-1107, 1983. (Summary) 本研究は，ラット腎γ-グルタミルトランスペプチダーゼの糖鎖構造を調べたもので，極めて多様性に富む糖鎖構造の概要が明らかにされた．
39.	Yoshiko Matsuda, Akihiko Tsuji and Nobuhiko Katunuma : Studies on the structure of γ-glutamyltranspeptidase. III. Evidence that the amino terminus of the heavy subunit is membrane binding segment, The Journal of Biochemistry, Vol.93, No.5, 1427-1433, 1983. (Summary) γ-グルタミルトランスペプチダーゼの膜結合様式について詳細に検討し，ヘビーサブユニットのアミノ末端付近の疎水性アミノ酸に富む部分が膜との結合に関与していることを明らかにした．
40.	Tsutomu Miura, Yoshiko Matsuda, Akihiko Tsuji and Nobuhiko Katunuma : Immunological cross reactivity of γ-glutamyltranspeptidase from human and rat kidney, liver and bile, The Journal of Biochemistry, Vol.89, No.1, 217-222, 1981. (Summary) 本研究は，ヒト腎及びラット腎よりγ-グルタミルトランスペプチダーゼを精製し，各々特異抗体を調製したのち，ラット腎，肝及びヒト腎，胆汁中のγ-グルタミルトランスペプチダーゼの免疫学的性質を比較検討した．
41.	Yoshiko Matsuda, Akihiko Tsuji and Nobuhiko Katunuma : Studies on the structure of γ-glutamyltranspeptidase. I. Correlation between sialylation and isozymic, The Journal of Biochemistry, Vol.87, No.No 4, 1243-1248, 1980. (Summary) 本研究は，γ-グルタミルトランスペプチダーゼの等電点多様性とシアル酸含量の関係を調べたもので，等電点の多様性は，タンパク部分ではなく糖鎖中のシアル酸含量の違いによることを明らかにした．
42.	Akihiko Tsuji, Yoshiko Matsuda and Nobuhiko Katunuma : Studies on the structure of g-glutamyltranspeptidase. II. Location of the segment anchoring γ-glutamyltranspeptidase to the membrane, The Journal of Biochemistry, Vol.87, No.No 6, 1567-1571, 1980. (Summary) 本研究は，γ-グルタミルトランスペプチダーゼの膜結合様式について調べたもので，ヘビーサブユニットのアミノ末端付近に膜結合部位があることを明らかにした．
43.	Akihiko Tsuji, Yoshiko Matsuda and Nobuhiko Katunuma : Characterization of human serum γ-glutamyltranspeptidase, Clinica Chimica Acta, Vol.104, No.3, 361-366, 1980. (Summary) 本研究は，ヒト血清，胆汁中のγ-グルタミルトランスペプチダーゼの構造比較を行い，本酵素の血液·胆汁中への遊出機序について検討した．
44.	Akihiko Tsuji, Yoshiko Matsuda and Nobuhiko Katunuma : Purification and characterization of γ-glutamyltranspeptidase from human bile, Biomedical Research, Vol.1, 410-416, 1980. (Summary) 本研究は，ヒト胆汁よりγ-グルタミルトランスペプチダーゼを単一に精製し，その性質を調べた．
45.	Yoshiko Matsuda, Akihiko Tsuji, Nobuhiko Katunuma, Masanori Hayashi and Yoshiyata Takahashi : Studies on liver argininosuccinate synthetase in a patient with citrullinemia and in normal subjects, The Journal of Biochemistry, Vol.85, No.No 1, 192-195, 1979. (Summary) 本研究は，肝生検試料を用いてシトルリン血症患者のアルギノコハク酸合成酵素の性質を正常者酵素と比較したもので，患者酵素の動力学的性質に異常を認め，臨床症状と酵素異常の関係を論じた．
46.	上田敦子, 大西悦子, Shiro Saito, Yoshiko Matsuda, Akihiko Tsuji and 勝沼信彦 : 血清Ornithin carbamyltransferaseの脂肪肝に対する診断的意義, 臨床化学, Vol.6, No.2, 125-130, 1978. (Summary) 本研究は，実験的肝炎，脂肪肝のウサギ血清オルニチントランスカルバミルトランスフェラーゼ活性を調べ，血清オルニチントランスカルバミルトランスフェラーゼ活性値は，脂肪肝の指標になることを示した．

Academic Paper (Unrefereed Paper):

1.	Yoshiko Matsuda, Hitoshi Hori, Akihiko Tsuji, Hideko Nagasawa, Yoshihiro Uto, Rieko Kuroda, 葛西宗江, Miwa Bando, 吉田一郎, 上田祐司 and サハルディン B. モハマッド : 新医薬品の開発をめざした脳神経特異的発現遺伝子産物のプロテオミクス解析, Bulletin of Faculty of Engineering, The University of Tokushima, Vol.46, 49-56, 2001. (Summary) 本論文では，新薬開発における新規標的分子の同定のための脳神経特異的遺伝子産物のプロテオミクス解析に関する成果を報告した．
2.	Masami Nagahama, Ichiro Yoshida, Keiichi Uyemura, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : Proteolytic Cleavage of the Neural Cell Adhesion Molecule L1 by Subtilisin-Like Proprotein Convertases, Keio University Symposia for Life Science and Medicine, Vol.2, 261-266, 1999. (Summary) L1蛋白質は神経の分化，機能と関係していると考えられている接着蛋白である．L1蛋白質はプロセス部位にSubtilisin-like proprotein convertaseの切断配列である塩基性アミノ酸対を持っているが，そのプロセシング機構は不明である．本研究では，L1蛋白質のプロセシングに関与するプロテアーゼについて，特にSPCについて検討した．培養細胞でL1蛋白質前駆体とSPC (furin, PACE4, PC6, PC1, PC4, PC8)を共発現すると，furin, PACE4, PC6によってプロセシングされることが判明した．

Review, Commentary:

1.	森健二, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : 先天性異常アルブミン症，無アルブミン血症，先天代謝異常症候群-遺伝子解析の進歩と成果-, Nihon Rinsho. Japanese Journal of Clinical Medicine, Vol.19, No.5, 657-670, May 1998. (Summary) 無アルブミン症，異常アルブミン症について，最近の解析結果を解説した．
2.	森健二, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : 先天性異常アルブミン症，無アルブミン血症, 先天代謝異常症候群ー遺伝子解析の進歩と成果, Vol.19, 123-127, 1998. (Summary) アルブミンの異常症の分類，病因について，最新の知見を解説した．
3.	Yoshiko Matsuda and Akihiko Tsuji : 前駆体蛋白質の活性化とケキシンファミリー，プロセシングプロテアーゼ, 蛋白質核酸酵素, Vol.42, No.14, 2355-2361, Aug. 1997.
4.	Yoshiko Matsuda, Akihiko Tsuji, Hideaki Nagamune, Tetsuya Akamatsu, Chiemi Hine, Kazuaki Muramatsu, Kenji Mori, Yasuhiro Tamai and Kayoko Yonemoto : Novel members of mammalian Kexin family proteases, PACE4C, PACE4D, PC7A and PC7B., Advances in Experimental Medicine and Biology, Vol.389, 63-71, Sep. 1996. (Summary) ペプチドホルモンや増殖因子等は不活性な前駆体として合成され, 特定の塩基性アミノ酸部位での限定切断を経て初めて活性化される. Kexin family proteaseはこのプロセシングを担う重要な酵素であり, 本研究では我々が新規メンバーをクローニングし, その構造, 組織分布等を明らかにした. (Keyword) Processing protease
5.	Yoshiko Matsuda, Akihiko Tsuji, Hideaki Nagamune, Tetsuya Akamatsu, Chiemi Hine, Kazuaki Muramatsu, Kenji Mori, Yasuhiro Tamai and Kayoko Yonemoto : Novel members of mammalian Kexin family proteases, PACE4C, PACE4D, PC7A and PC7B, Intracellular protein catabolism, Vol.389, No.7, 63-71, Jan. 1996.
6.	Akihiko Tsuji, 窪野慎一, Yuka Sasaki, Yoshiko Matsuda, 中山久幸 and 寺山日出男 : ピロリドンカルボン酸ソーダによるビオプラーゼの安定化とレンズ洗浄剤としての応用, 日本コンタクトレンズ学会誌, Vol.38, 232-236, Jan. 1996. (Summary) ピロリドンカルボン酸は，ビオプラーゼ(ズブチリシン)の自己分解作用を抑制し，安定化した．ビオプラーゼはピロリドンカルボン酸溶液中では室温においても安定であり，冷却の必要がなく，コンタクトレンズの洗浄剤として有用であると考えられた．
7.	Yoshiko Matsuda : ケキシン様プロテアーゼファミリー, 生体の科学, Vol.46, No.5, 497-498, Oct. 1995.
8.	Yoshiko Matsuda : Kexin型プロテアーゼ, バイオサイエンスとインダストリー, Vol.53, No.12, 1045-1046, Jan. 1995.
9.	Yoshiko Matsuda, Akihiko Tsuji and Nobuhiko Katunuma : Quantitative abnormality of argininosuccinate synthetase in a patient with citrullinemia, Advancesin Experimental Medicine and Biology, Urea Cycle Disease, Vol.153, 77-82, 1984.
10.	Yoshiko Matsuda, Akihiko Tsuji, 久野健夫 and 勝沼信彦 : γ-GTPの生体内運命，血清，胆汁への逸脱機構, 日本臨床化学会記録, Vol.23, 12-13, 1983. (Summary) 膜結合酵素であるγ-GTPは，特にアルコール性肝炎など肝障害時，胆汁のうっ滞時血中へ遊離しγ-GTP値が急増する．本研究では，γ-GTPの生合成と細胞内移行，胆汁，血中への遊離機構について，最新の知見を解説する．
11.	林真功, 高橋善弥太, Yoshiko Matsuda, Akihiko Tsuji and 勝沼信彦 : アルギニノコハク酸合成酵素の質的異常に起因するシトルリン血症, Metabolism and Disease, Vol.15, No.No 9, 1253-1257, 1978. (Summary) シトルリン血症の特殊な1例を経験し，本症の病因がASSの量には差がなく，質的異常に起因することを明らかにしたので，報告する．

Proceeding of International Conference:

1.	Keizo Yuasa, Kaori Suzue, Masami Nagahama, Yoshiko Matsuda and Akihiko Tsuji : Subtilisin-like proprotein convertase PACE4 is transcriptionally regulated by E2F/Rb, International Symposium on Medical and Biological Perspectives in Proteases and Their Inhibitors. Satellite meeting of the 20th IUBMB International congress and 11th FAOBMB Congress, Hyogo, Jun. 2006.
2.	Tetsuya Masuda, Keizo Yuasa, Masami Nagahama, Yoshiko Matsuda and Akihiko Tsuji : Transcriptional Activation of processing protease PACE4 during myogenic differentiation., International Symposium on Medical and Biological Perspectives in Proteases and Their Inhibitors. Satellite meeting of the 20th IUBMB International congress and 11th FAOBMB Congress, Hyogo, Jun. 2006.
3.	Takuya Yanagino, Keizo Yuasa, Masami Nagahama, Yoshiko Matsuda and Akihiko Tsuji : Transcriptional Regulation of Fibrillin-2 Gene during Chondrogenrsis, 20th IUBMB International Congress of Biochemistry and Molecular Biology and 11th FAOBMB Congress, Kyoto, Jun. 2006.
4.	Akihiko Tsuji, Keizo Yuasa, Masami Nagahama and Yoshiko Matsuda : Role of PACE4 and furin in cell differentiation, International Conference on Serine-Carboxyl Peptidases 2005, Kyoto, Nov. 2005.
5.	Akihiko Tsuji, Yayoi Kikuchi and Yoshiko Matsuda : Reticulocalbin-3: A novel protein which regulates biosynthesis of subtilisin-like proprotein convertase, The 1st Pacific-Rim International Conference on Protein Science, 129, Yokohama, Apr. 2004. (Summary) レチキュロカルビン3は，遺伝子構造から推定される新規のCRECファミリーに属するカルシウム結合蛋白質であるが，これまで蛋白レベルの研究はまったく行われていない．我々はSPC阻害蛋白を安定発現するGH4C1細胞に特異的にレチキュロカルビン3が蓄積することを発見し，この蛋白質のカルシウム結合能，細胞分布，細胞内局在性を調べた．また，この蛋白質はSPCの前駆体と小胞体で一時的に結合することを見出し，SPCの生合成にシャペロンとして関わることを示唆した．
6.	Go Futamatsu, Tomonori Shimada, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : Functional analysis of the processing protease PACE4 during chondrogenic differentiation of ATDC5 cells, International Symposium on Medical and Biological Perspectives in Proteases and Their Inhibitors., 36, Hyogo, Nov. 2003.
7.	Akihiko Tsuji, Shizuyo Koide, Keizo Yuasa and Yoshiko Matsuda : Involvement of PACE4 in activation of TGF beta-related factors in the ECM, International Symposium on Medical and Biological Perspectives in Proteases and Their Inhibitors., 20, Hyogo, Nov. 2003.
8.	Akihiko Tsuji, Yayoi Kikuchi, Yukimi Sato, Shizuyo Koide and Yoshiko Matsuda : Reticulocalbin-like protein (RCN3): A novel protein which regulates biosynthesis of subtilisin-like proprotein convertase (SPC), 3rd General Meeting of the International Proteolysis Society, 187, Nagoya, Nov. 2003.
9.	Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : Enhancement of selectivity of α1-antitrypsin variant against subtilisin-like proprotein convertase by mutagenesis in RSL and application for functional analysis, Second General Meeting of International Proteolysis Society, 59, Germany, Oct. 2001. (Summary) 非常に基質特異性の類似した哺乳類ズブチリシン様プロプロテインコンベルターゼ，PACE4, furin, PC6に選択性にある阻害蛋白質を，α1アンチトリプシンのタンパク工学的改変によって作成することができた，
10.	Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : Unique Mechanism Governing Cell-Specific Expression and Biosynthetic Processing of PACE4, International Proteolysis Society First Gemeral Meeting, 38, Michigan, USA, Sep. 1999.
11.	Yoshiko Matsuda : Regulation of subtilisin like proprotein convertase PACE4 gene expression and post translational activation, 6th International Symposium on Proteinase Inhibitors and Biological Control, 25, Slovenia, Jun. 1999.
12.	Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : Regulation of PACE4 expression under dynamic bHLH network and its physiological importance, 6th CGGH Symposium "Roles of Proteolysis in Health and Disease", 3, Tokushima, May 1999.
13.	Kenji Mori, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : Subtilisin-like Proprotein Convertase, PACE4, participates in the Processing of Plasma protein precursors in human hepatoma HepG2 cells, 6th CGGH Symposium "Roles of Proteolysis in Health and Disease", 80, Tokushima, May 1999.
14.	Shin-ichi Hasegawa, Ichiro Yoshida, Shizuyo Koide, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : Transcriptional Regulation of the Human PACE4 Gene Expression in HepG2 and GH₄C₁ cells, 6th CGGH Symposium "Roles of Proteolysis in Health and Disease", 83, Tokushima, May 1999.
15.	Emi Hashimoto, Takayuki Ikoma, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : Proprotein Convertase PACE4 is inhibited by α₁-Antitrypsin cariant Portland, 6th CGGH Symposium "Roles of Proteolysis in Health and Disease", 82, Tokushima, May 1999.
16.	Miwa Bando, Atsushi Matsuoka, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : Physiological Function of PACE4 on megakaryoblastic differentiation, 6th CGGH Symposium "Roles of Proteolysis in Health and Disease", 84, Tokushima, May 1999.
17.	Ichiro Yoshida, Shizuyo Koide, Akira Nakagawara, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : Regulation of PACE4 Expression by bHLH factor in neuroblastoma cells, 6th CGGH Symposium "Roles of Proteolysis in Health and Disease", 85, Tokushima, May 1999.
18.	Hideaki Nagamune, Chikako Ohnishi, Ayako Katsuura, Yasunori Taoka, Kenzo Fushitani, Robert A. Whiley, Kikuji Yamashita, Akihiko Tsuji, Yoshiko Matsuda, Hiroki Kourai and Seiichiro Kitamura : Intermedilysin A cytolytic toxin specific for human cells of a Streptococcus intermedius isolated from human liver abscess, XIII Lancefield International Symposium on Streptococci and Streptococcal Diseases; In "Streptococci and The Host"(T. Horaud, A. Bouvet, R. Leclercq, H. de Montclos, M. Sicard, eds.): Advances in Experimental Medicine and Biology, Vol.418, 773-775, Paris, Sep. 1997. (Summary) S. intermedius肝膿瘍分離株から単離されたヒト細胞特異的な細胞溶解毒素インターメディリシン(ILY)の性質を検討した．これまで知られていたチオール基修飾試薬への非感受性やコレステロールへの低感受性に加え，電子顕微鏡観察からILYは直径30-50nmの膜孔を形成し細胞を破壊することが示された．またILYの部分遺伝子構造解析の結果からILYはチオール活性化毒素群と同じ分子祖先から進化したものであることが示唆された．
19.	Kenji Mori, 今牧明義, Tetsuya Akamatsu, Akihiko Tsuji, Masami Nagahama and Yoshiko Matsuda : A novel human PACE4 isoform, PACE4E, is an active protease containing a hydrophobic cluster at the carboxy terminus, 17th International Congress of Biochemistry and Molecular Biology, San Francisco, Aug. 1997.
20.	Akihiko Tsuji, Chiemi Hine, Shigeru Yoshida, Miwa Bando, Kenji Mori, Tetsuya Akamatsu and Yoshiko Matsuda : Gene organization and Alternative Splicing of Human PACE4, Subtilisin-Like Proprotein Convertase, 17th International Congress of Biochemistry and Molecular Biology, FASEB.J., Vol.11, No.9, 1224, San Francisco, Aug. 1997.
21.	Hideaki Nagamune, Kazuaki Muramatsu, Masakatsu Higashine, Tetsuya Akamatsu, Yasuhiro Tamai, Yasuo Yonetomi, Akihiko Tsuji, Keisuke Izumi, Takemasa Sakaguchi, Tetsuya Yoshida and Yoshiko Matsuda : Cyclic AMP-inducible procalcitonin processing in thyroidal parafollicular cells is regulated by the Kexin family protease, PC1., International Symposium on Medical Aspects of Protease Inhibitors; In "Medical Aspects of Proteases and Protease Inhibitors": Biomedical and Health Research, Vol.15, 22-33, Amsterdam, May 1997. (Summary) ラット甲状腺においてKexin様プロテアーゼの免疫組織化学的解析を行った．その結果，カルシトニンを作る傍濾胞細胞ではPC1とPC2が強く発現しており，FurinやPC6の発現はわずかで，PACE4は検出できなかった．傍濾胞細胞株TTのウエスタンブロットでもPC1，PC2， Furin，PC6は検出されたが，cAMP刺激による成熟カルシトニン量の上昇と連動して急増する酵素はPC1だけであり，cAMP刺激に応答してカルシトニン量を制御するKexin様プロテアーゼはPC1である事を示した． (Keyword) Calcitonin / Processing / PC1
22.	Tetsuya Akamatsu, 吉田茂, 大黒成夫, Hideaki Nagamune, 長濱正巳, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : Expression of a novel PACE4 isoform, PACE4E, in developmental rat brain, The 12th International Symposium of Federation of Asian and Oceanian Biochemists and Molecular Biologists, Tokushima, Jun. 1996.

Proceeding of Domestic Conference:

1.	室下大樹, Keizo Yuasa, Masami Nagahama, Yoshiko Matsuda and Akihiko Tsuji : BMP6の活性化を介したサチライシン様プロプロテインコンベルターゼPACE4による軟骨分化誘導, 第82回日本生化学大会, Oct. 2009.
2.	Keizo Yuasa, 泰地裕美, Masami Nagahama, Yoshiko Matsuda and Akihiko Tsuji : 軟骨分化過程におけるサチライシン様プロプロテインコンベルターゼPACE4の機能解析, 第13回病態と治療におけるプロテアーゼとインヒビター学会, Aug. 2008.
3.	Keizo Yuasa, Masami Nagahama, Yoshiko Matsuda and Akihiko Tsuji : サチライシン様プロプロテインコンベルターゼPACE4は軟骨分化に必須である, 日本農芸化学会2008年度大会, Mar. 2008.
4.	Kazuaki Muramatsu, 関光太, 鈴木龍介, 前野貴則, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : オステオカルシンの成熟化に関与するプロセシング酵素の解析, 第80回日本生化学会大会, Dec. 2007.
5.	柳野卓也, Keizo Yuasa, 木村道江, Masami Nagahama, Yoshiko Matsuda and Akihiko Tsuji : 軟骨分化におけるフィブリリン-2の機能解析, 第80回日本生化学会大会, Dec. 2007.
6.	Keizo Yuasa, 影山陽子, Masami Nagahama, Yoshiko Matsuda and Akihiko Tsuji : ズブチリシン様プロプロテイン変換酵素PACE4は軟骨分化に必須である, 第80回日本生化学会大会, Dec. 2007.
7.	Keizo Yuasa, 増田哲也, 吉川千尋, Masami Nagahama, Yoshiko Matsuda and Akihiko Tsuji : ズブチリシン様プロプロテイン変換酵素PACE4は骨格筋分化に必須である, 第48回日本生化学会中国・四国支部例会, May 2007.
8.	柳野卓也, Keizo Yuasa, Masami Nagahama, Yoshiko Matsuda and Akihiko Tsuji : Transcriptional Regulation of Fibrilin-2 Gene during Chondrogenesis, 日本分子生物学会2006フォーラム, Dec. 2006.
9.	増田哲也, Keizo Yuasa, Masami Nagahama, Yoshiko Matsuda and Akihiko Tsuji : Subtilisin-like Proprotein Convertase (SPC)は骨格筋分化制御の重要因子である, 第11回病態と治療におけるプロテアーゼとインヒビター研究会, Aug. 2006.
10.	Keizo Yuasa, Masami Nagahama, Yoshiko Matsuda and Akihiko Tsuji : 軟骨分化におけるsubtilisin-like proprotein convertase (SPC)の機能解析, 第11回病態と治療におけるプロテアーゼとインヒビター研究会, Aug. 2006.
11.	Keizo Yuasa, Yoshiko Matsuda and Akihiko Tsuji : 軟骨分化におけるSubtilisin-like proprotein convertase(SPC)の機能解析, 第28回日本分子生物学会年会ワークショップ, Dec. 2005.
12.	Takuya Yanagino, Keizo Yuasa, Masami Nagahama, Yoshiko Matsuda and Akihiko Tsuji : Transcriptional regulation of fibrillin-2 during chondrogenesis, 第78回日本生化学会大会, Oct. 2005.
13.	Tetsuya Masuda, Keizo Yuasa, Masami Nagahama, Yoshiko Matsuda and Akihiko Tsuji : Transcriptional activation of proprotein convertase PACE4 during skeletal muscle differentiation, 第78回日本生化学会大会, Oct. 2005.
14.	Yayoi Kikuchi, Keizo Yuasa, Masami Nagahama, Yoshiko Matsuda and Akihiko Tsuji : The role of Reticulocalbin-3 in regulation of PACE4 activation and secretion, 第78回日本生化学会大会, Oct. 2005.
15.	Akihiko Tsuji, Keizo Yuasa and Yoshiko Matsuda : サチライシン様プロプロテインコンベルターゼのユニークな自己活性化制御機構, 第5回日本蛋白質科学会年会ワークショップ9, Jun. 2005.
16.	Keizo Yuasa, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : 骨格筋分化におけるプロセシングプロテアーゼPACE4の遺伝子発現調節の解析, 日本農芸化学会2005年度大会, Mar. 2005.
17.	Akihiko Tsuji, Keizo Yuasa and Yoshiko Matsuda : 哺乳類ズブチリシン様セリンプロテアーゼの特性，多様性と生理的意義, 日本農芸化学会2005年度大会ワークショップ, Mar. 2005.
18.	鈴江加織, Keizo Yuasa, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : E2F1によるPACE4遺伝子発現調節の解析, 第27回日本分子生物学会年会, Dec. 2004.
19.	Keizo Yuasa, Kaori Suzue, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : Transcriptional activation of proprotein convertase PACE4 by E2F1, 第77回日本生化学会大会, Oct. 2004.
20.	Akihiko Tsuji, Keizo Yuasa and Yoshiko Matsuda : Purification and characterization of oligopeptidase B from wheat germ. First identification of oligopeptidase B at the protein level in higer plant, 第77回日本生化学会大会, Oct. 2004.
21.	Yoshiko Matsuda, Akihiko Tsuji and Keizo Yuasa : Subtilisin like proprotein convertase familyの多様性と役割分担:ECM局在PACE4の細胞分化における役割, 第51回マトリックス研究会大会, 20-21, Apr. 2004.
22.	牧瀬広孝, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : α1-アンチトリプシン変異体を用いたSPC ファミリー基質特異性の解析, 第26回日本分子生物学会年会, Dec. 2003.
23.	Akihiko Tsuji, 菊池弥生 and Yoshiko Matsuda : ズブチリシン様プロプロテインコンベルターゼ生合成におけるEF-Hand Ca結合タンパク，Reticulocalbin-like Protein (RLP)の機能同定, 第26回日本分子生物学会, Dec. 2003.
24.	Yayoi Kikuchi, Yukimi Sato, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : Reticulocabin: A novel protein which regulates biosynthesis of subtilisin-like proprotein convertase, 第76回日本生化学会大会, Oct. 2003.
25.	Yoshiko Matsuda and Akihiko Tsuji : A unique 26-kDa cysteine protease induced in wheat embryo during germination, 第76回日本生化学会大会, Oct. 2003.
26.	Akihiko Tsuji, Hirotaka Makise and Yoshiko Matsuda : Antitrypsin mutants: Tool for functional analysis of serine-endopeptidases, 第76回日本生化学会大会, Oct. 2003.
27.	Akihiko Tsuji, 佐藤幸美 and Yoshiko Matsuda : PACE4生合成におけるレティキュロカビンの機能解析—シャペロンとしての役割—, 第3回日本蛋白質科学会年会, Jun. 2003.
28.	二松豪, 嶋田知訓, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : ATDC5細胞の内軟骨分化過程におけるプロセシングプロテアーゼPACE4の機能解析, 第25回日本分子生物学会年会, Dec. 2002.
29.	Akihiko Tsuji, 生駒貴之, 橋本英美, 山下大 and Yoshiko Matsuda : ズブチリシン様プロプロテインコンベルターゼ(SPC)に特異阻害活性を持つα1-アンチトリプシン改変体の作製と機能解析への応用, 平成14年度日本生物工学会大会, Oct. 2002.
30.	佐藤幸美, 田頭和幸, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : プロテオーム解析によるSPCファミリーの基質タンパクの検索:Ca結合タンパクReticulocabinについて, 第75回日本生化学会大会, Oct. 2002.
31.	田中幸子, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : ズブチリシン様プロプロテインコンヴェルターゼ(SPC)に選択的阻害活性を有するα1アンチトリプシン改変体の作成と応用, 第75回日本生化学会大会, Oct. 2002.
32.	高橋保充, 櫻井謙介, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : 細胞外マトリックスにおけるズブチリシン様プロセシングプロテアーゼPACE4の役割, 第75回日本生化学会大会, Oct. 2002.
33.	小出静代, Kazunori Toida, Kazunori Ishimura, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : 胎盤特異的bHLH型転写因子MASH-2によるPACE4の胎盤発生過程における制御, 第75回日本生化学会大会, Oct. 2002.
34.	Miwa Bando, 山下大, Hiroshi Kido, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : 巨核球分化におけるプロセシングプロテアーゼPACE4とfurinの転写調節機構, Seikagaku, Vol.74, No.8, 1016, Oct. 2002.
35.	Akihiko Tsuji, 生駒貴之, 橋本英美, 山下大 and Yoshiko Matsuda : ズブチリシン様プロプロテインコンベルターゼに選択的阻害作用を有するアンチトリプシン改変体の開発, 第2回日本蛋白質科学会年会, Jun. 2002.
36.	吉田聡子, Kikuji Yamashita, Akihiko Tsuji, Seiichiro Kitamura and Yoshiko Matsuda : 造血及び間質幹細胞培養の開発, 徳島生物学第110回総会, 110, 2002.
37.	小出静代, 清蔭恵美, 藤原良次, 川並由季, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : ヒト胎盤でのPACE4遺伝子発現と生理機能の解析, 第24回日本分子生物学会年会, Dec. 2001.
38.	吉田一郎, 小出静代, Kazunori Toida, Kazunori Ishimura, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : 神経特異的bHLH型転写因子Mash-1による前駆体タンパク質活性化酵素PACE4の神経発生過程における制御, 第24回日本分子生物学会年会, Dec. 2001.
39.	嶋田知訓, Miwa Bando, 開裕司, 宿南知佐, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : ATDC5細胞の軟骨分化過程におけるSPCファミリーの動態, 第74回日本生化学会大会, Oct. 2001.
40.	Akihiko Tsuji, 生駒貴之 and Yoshiko Matsuda : サブチリシン様プロプロテインコンベルターゼ，PACE4, Furin, PC6に対する選択的阻害作用を持つアンチトリプシン改変体の作成, 第74回日本生化学会大会, Oct. 2001.
41.	Miwa Bando, 嶋田知訓, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : 巨核球分化におけるプロセシングプロテアーゼPACE4の生理機能の解析, 第74回日本生化学会大会, Oct. 2001.
42.	櫻井謙介, 谷口孝純, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : プロセシングプロテアーゼPACE4の活性発現と細胞外での機能の解析, 第53回日本細胞生物学会, Oct. 2000.
43.	櫻井謙介, 谷口孝純, 清蔭恵美, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : 細胞外マトリックスにおけるヒト前駆体タンパク質プロセシングプロテアーゼPACE4の機能解析, 第73回日本生化学会大会, Oct. 2000.
44.	松岡厚志, Miwa Bando, 平山幸子, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : ズブチリシン様前駆体タンパク質プロセシングプロテアーゼPACE4アイソフォーム:PACE4Cの生理的役割, 第73回日本生化学会大会, Oct. 2000.
45.	吉田一郎, 小出静代, 中川原章, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : 神経芽細胞腫におけるbHLH型転写因子hASH-1による前駆体タンパク質活性化酵素PACE4遺伝子の発現制御, 第73回日本生化学会大会, Oct. 2000.
46.	Tetsuya Akamatsu, 吉田茂, Hideaki Nagamune, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : ラット脳発生過程でのプロセシング酵素PACE4の発現, 日本生化学会第70回大会, Sep. 1997.
47.	Tetsuya Akamatsu, 吉田茂, 大黒成夫, Hideaki Nagamune, 長濱正巳, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : プロセシング酵素PACE4Eのラット脳発生過程での発現, 日本生化学会第69回大会・日本分子生物学会第19回年会合同年会, Aug. 1996.
48.	Tetsuya Akamatsu, 吉田茂, 水野勝弘, 長田香弥, 米本佳余子, 森健二, Hideaki Nagamune, Akihiko Tsuji, Eric Grouzmann and Yoshiko Matsuda : Kexin様プロテアーゼPC7の中枢神経系における細胞特異的発現, 日本生化学会第68回大会, Sep. 1995.
49.	Akihiko Tsuji, Hideaki Nagamune, Tetsuya Akamatsu, 日根智恵美, 村松和明, 森健二, 玉井靖啓, 米本佳余子 and Yoshiko Matsuda : 新Kexin様プロテアーゼの構造と組織分布, 日本先天代謝異常学会第36回大会, Nov. 1994.
50.	Tetsuya Akamatsu, 今村恵美, Hideaki Nagamune, Akihiko Tsuji and Yoshiko Matsuda : 新しいkexinファミリープロテアーゼPC7の細胞特異的発現-in situ hybridizationによる解析, 日本細胞生物学会第47回大会, Sep. 1994.
51.	玉井靖啓, 村松和明, Tetsuya Akamatsu, 日根智恵美, 森健二, Hideaki Nagamune, Akihiko Tsuji, Keisuke Izumi and Yoshiko Matsuda : 新ペプチドホルモンプロセッシングプロテアーゼPACE4Cの細胞特異的発現, 日本細胞生物学会第47回大会, Sep. 1994.
52.	Hideaki Nagamune, Akihiko Tsuji, 村松和明, Tetsuya Akamatsu, 東根一也, 日根智恵美, Keisuke Izumi, 坂口剛正, 吉田哲也, Sumihare Noji and Yoshiko Matsuda : 甲状腺傍濾胞細胞におけるサチラーゼファミリープロテアーゼの発現, 日本生化学会第66回大会, Oct. 1993.
53.	Tetsuya Akamatsu, Akihiko Tsuji, Hideaki Nagamune and Yoshiko Matsuda : ラット肝α-マクログロブリン-プロテアーゼ複合体の性質, 日本生化学会第65回大会, Oct. 1992.
54.	Akihiko Tsuji, Tetsuya Akamatsu, 尾田領一, Hideaki Nagamune and Yoshiko Matsuda : ラット肝α-マクログロブリン-プロテアーゼ複合体の性質, 日本生化学会中四国支部第55回例会, Apr. 1992.
55.	Koji Kishimoto, 辻昭彦, Yoshiko Matsuda and 勝沼信彦 : ラットジストロフィンの精製とタンパク特性, 第63回日本生化学会大会(口頭), Sep. 1990.

Et cetera, Workshop:

1.	Yoshiko Matsuda : α₂-マクログロブリンをキャリアーとした肝指向性ドラッグデリバリーシステムの開発, 長瀬科学技術振興財団研究報告集, Vol.8, 147-157, Dec. 1996.

Patent:

1.	Yoshiko Matsuda and Akihiko Tsuji : ズブチリシン様プロプロテインコンベルターゼ·PACE4に対するモノクローナル抗体及びその利用, 2002-292869 (Oct. 2002), .

Professor Emeritus : Matsuda, Yoshiko

Research

Field of Study

Subject of Study

Book / Paper

Book:

Academic Paper (Judged Full Paper):

Academic Paper (Unrefereed Paper):

Review, Commentary:

Proceeding of International Conference:

Proceeding of Domestic Conference:

Et cetera, Workshop:

Patent: